Wenn ein Forschungspeptid als \u201cHPLC-verifiziert\u201d oder \u201cHPLC + MS-gepr\u00fcft\u201d bezeichnet wird, kommen dabei zwei sich erg\u00e4nzende Analysemethoden zum Einsatz. Sie werden oft zusammen genannt, messen jedoch unterschiedliche Gr\u00f6\u00dfen. Wenn man diesen Unterschied kennt, l\u00e4sst sich jedes Analysezertifikat leichter interpretieren.<\/p>\n
Bei der Hochleistungsfl\u00fcssigkeitschromatographie wird eine gel\u00f6ste Probe unter hohem Druck durch eine gepackte S\u00e4ule gepresst. Je nachdem, wie stark sie mit dem S\u00e4ulenmaterial interagieren, bewegen sich verschiedene Molek\u00fcle mit unterschiedlicher Geschwindigkeit durch die S\u00e4ule, sodass sich das Hauptpeptid von zugeh\u00f6rigen Verunreinigungen trennt. Ein Detektor erfasst jede Komponente als Peak. Durch die Integration der Fl\u00e4che unter dem Hauptpeak im Verh\u00e4ltnis zur Gesamtmenge berechnet ein Analyst einen Reinheitsprozentsatz.<\/p>\n
Die HPLC ist daher eine Reinheit<\/strong> Tool. Es gibt Auskunft dar\u00fcber, welchen Anteil der dominierende Stoff im Vergleich zu allen anderen Bestandteilen der Probe ausmacht \u2013 allein daraus l\u00e4sst sich jedoch nicht ableiten, um welchen Stoff es sich bei diesem dominierenden Stoff tats\u00e4chlich handelt.<\/p>\n Bei der Massenspektrometrie (MS) werden die Molek\u00fcle ionisiert und ihr Masse-zu-Ladungs-Verh\u00e4ltnis mit hoher Pr\u00e4zision gemessen. Bei einem Peptid wird die gemessene Masse mit der theoretischen Masse verglichen, die sich aus seiner Aminos\u00e4uresequenz ableiten l\u00e4sst. Eine gute \u00dcbereinstimmung best\u00e4tigt Identit\u00e4t<\/strong>: Das Molek\u00fcl entspricht tats\u00e4chlich der auf dem Etikett angegebenen Sequenz und ist kein anderes Peptid \u00e4hnlicher Gr\u00f6\u00dfe.<\/p>\n MS ist ein Identifizierungsinstrument. Es eignet sich hervorragend, um zu best\u00e4tigen, dass \u201ces sich um das richtige Molek\u00fcl handelt\u201d, ist jedoch nicht die prim\u00e4re Methode zur Quantifizierung der Reinheit.<\/p>\n Betrachten Sie die L\u00fccken, die jede Methode hinterl\u00e4sst:<\/p>\n In Kombination beantwortet die HPLC die Frage \u201cWie rein?\u201d, w\u00e4hrend die MS die Frage \u201cHandelt es sich um das richtige Molek\u00fcl?\u201d beantwortet. Ein Analysezertifikat (COA), das beide Verfahren umfasst, liefert ein weitaus vollst\u00e4ndigeres Bild als jedes der beiden Verfahren f\u00fcr sich allein. Aus diesem Grund hat sich \u201cHPLC + MS\u201d zum praktischen Standard f\u00fcr die Dokumentation von Peptiden in Forschungsqualit\u00e4t entwickelt.<\/p>\n In einem kombinierten Bericht sollten Sie ein HPLC-Chromatogramm (idealerweise einen sauberen dominanten Peak mit einem angegebenen Reinheitsprozentsatz) und ein MS-Spektrum oder eine MS-Tabelle sehen, in der neben der berechneten Masse die beobachtete Masse aufgef\u00fchrt ist. \u00dcberpr\u00fcfen Sie, ob die beobachtete Masse mit dem Molekulargewicht in der Produktspezifikation \u00fcbereinstimmt und ob die Reinheitsangabe der von Ihnen bestellten Qualit\u00e4t entspricht.<\/p>\n Sobald Sie die beiden Techniken klar voneinander getrennt haben, ist ein Forschungspeptid-COA keine Zahlenwand mehr, sondern eine schnelle, sichere Verifizierung.<\/p>\n Bei den genannten Verbindungen handelt es sich um Referenzmaterialien in Forschungsqualit\u00e4t, die ausschlie\u00dflich f\u00fcr den Laborgebrauch und nicht f\u00fcr den menschlichen oder tierischen Verzehr bestimmt sind.<\/em><\/p>","protected":false},"excerpt":{"rendered":" HPLC und Massenspektrometrie beantworten zwei verschiedene Fragen zu einem Peptid. Wenn Sie wissen, was jedes einzelne Ma\u00df misst, ist jeder Echtheitszertifikat leichter zu lesen.<\/p>","protected":false},"author":1,"featured_media":240,"comment_status":"open","ping_status":"open","sticky":false,"template":"","format":"standard","meta":{"footnotes":""},"categories":[6],"tags":[],"class_list":["post-26","post","type-post","status-publish","format-standard","has-post-thumbnail","hentry","category-quality-testing"],"yoast_head":"\nWas Massenspektrometrie misst: Identit\u00e4t<\/h2>\n
Warum werden beide zusammen verwendet?<\/h2>\n
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Die beiden Ergebnisse nebeneinander betrachten<\/h2>\n
Praktische Tipps<\/h2>\n
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